Evaluación de metodologías de extracción de ADN de plantas recalcitrantes

Autores/as

  • Taryn Suazo Ubieta Universidad Nacional Autónoma de Nicaragua, Managua. Laboratorio de Biotecnología
  • Samantha Miranda Calero Universidad Nacional Autónoma de Nicaragua, Managua. Laboratorio de Biotecnología
  • Ena Rivers Carcache Universidad Nacional Autónoma de Nicaragua, Managua. Laboratorio de Biotecnología
  • Martha Lacayo Romero Universidad Nacional Autónoma de Nicaragua, Managua. Laboratorio de Biotecnología
  • Daniel Tenorio Juárez Universidad Nacional Autónoma de Nicaragua, Managua. Laboratorio de Biotecnología

DOI:

https://doi.org/10.5377/torreon.v9i24.9723

Palabras clave:

ADN, extracción, kits comerciales, protocolos, recalcitrantes

Resumen

La obtención ácido desoxirribonucleico (ADN) purificado es un punto clave para el desarrollo de técnicas moleculares que permiten caracterizar una especie en estudio. Las matrices vegetales constituyen una de las muestras de mayor complejidad debido a los compuestos químicos que la forman y que muchas veces difieren su concentración en dependencia de la variedad en estudio; este es el caso de muestras recalcitrantes de variedades de cacao (Theobroma cacao) y café (Coffea arabica) donde la pérdida de ADN puede incluso ocurrir en la maceración de las muestras por fenolización del material. En el presente estudio se evaluaron tres kits comerciales disponibles mediante los cuales se obtienen excelentes recobros para variedades no recalcitrantes, así como también modificaciones realizadas a los protocolos tradicionales de Doyle & Doyle (1987) y Doyle & Doyle (1990). Los resultados obtenidos confirmaron el efecto de la variedad y la especie sobre el método de extracción, y de igual manera, que los métodos modificados pueden presentar mayor recobro y pureza que los kits comerciales para algunas especies vegetales.

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Citas

Alejos, L., Aragón, M., & Cornejo, A. (2008). Extracción y purificación de ADN. México: UNAM.

Arbeláez, J., Acevedo, J. y Jaramillo, R. (2011). Metabolitos secundarios en el guayacán amarillo y en el guayacán rosado. Scientia et Technica 47:297- 301.

Baker S.S., Rugh C.L. y Kamalay J.C. (1990). RNA and DNA isolation from recalcitrant plant tissues. Biotechniques; 9(3):268-72.

Doyle, J. (1990). DNA PROTOCOLS FOR PLANTS. NATO ASY Series, 283-284.

Doyle, J., & Doyle, J. (1987). A rapid DNA isolation procedure for small quantities of fresh leaf tissue. Phytochemical bulletin, 19:11–15.

Hughes D.W. y Galau G. (1988). Preparation of RNA from cotton leaves and pollen. Plant Molecular Biology Rep. 6:253-257.

Jobes D. V., Hurley D. L. y Thien L.B. (1995). Plant DNA isolation: A method to effi ciently remove polyphenolics, polysaccharides, and RNA. Taxon 44: 379 – 386.

Li, Y. X., Su, Z. X. y Chen, F. (2002). Rapid Extraction of Genomic DNA From Leaves and Bracts of Dove Tree (Davidia involucrata). Plant Molecular Biology Reporter 20(2):185.

Lopez Mora, P., Lopez Gutierrez, A., & Marulanda-Angel, M. (2011). Estandarización de la extracción de adn genómico en Tabebuia rosea (Bertol.) DC. y Cordia alliodora (Ruiz y Pav.) Okén. Temas Agrarios, 16(2), 28-41.

Martínez, A.J. (2010). Principios activos en el Guayacán Amarillo (Tabebuia chrysantha Jacq. Nicholson, Bignoniaceae) y en el Guayacán Rosado (Tabebuia rosea Bertol. DC). Proyecto de Grado, Universidad del Quindío, Armenia - Colombia.

McLay, T. (4 de Septiembre de 2017). Hight quality DNA extraction protocol from recalcitrant plant tissues. Obtenido de protocols.io.

QIAGEN. (2006). Protocolo: Purification of total DNA from Plant Tissue (Miniprotocol). Estados Unidos: QIAGEN Group.

QIAGEN. (2011). DNeasy® Plant Mini Kit . Estados Unidos: QIAGEN Group.

Sharma, A.D., Gill, P.K. y Singhdna, P. (2002). Isolation From Dry and Fresh Samples of Polysaccharide-Rich Plants. Plant Molecular Biology Reporter 20(4):415.

Shepherd, L., & McLay, T. (2011). Two micro-scale protocols for the isolation of DNA from polysaccharide-rich plant tissue. Journal of Plant Research, 311-314.

Tibbits, J., McMannus, L., Spokevicius, A., & Bossinger, G. (2006). A rapid method for tissue collection and high-throughput isolation of genomic DNA from mature trees. Plant Molecular Biology Reporter, 81-91.

Wilson, I. G. (1997). Inhibition and facilitation of nucleic acid amplification. Applied and Environmental Microbiology 63: 3741 – 3751.

Publicado

2020-05-07

Cómo citar

Suazo Ubieta, T., Miranda Calero, S., Rivers Carcache, E., Lacayo Romero, M., & Tenorio Juárez, D. (2020). Evaluación de metodologías de extracción de ADN de plantas recalcitrantes. Revista Torreón Universitario, 9(24), 45–57. https://doi.org/10.5377/torreon.v9i24.9723

Número

Sección

ARTÍCULOS CIENTÍFICOS

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